ERM-BF427d 98140玉米標(biāo)準(zhǔn)品是4種98140玉米種子粉認(rèn)證參考物質(zhì)(CRMs)之一,含有不同的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。ERM-BF427d由品種TF0750C的雜合子98140玉米和品種X1083A的非改良玉米的全種子生產(chǎn),均由先鋒高育種國際公司(Johnston,IA,美國)提供。根據(jù)先鋒公司提供的信息,雜合子98140玉米的轉(zhuǎn)基因供體為母本。
性能指標(biāo)與應(yīng)用規(guī)范
1. 核心技術(shù)指標(biāo)
均勻性:瓶間差異 CV≤2.8%,滿足 ISO 13528 對轉(zhuǎn)基因參考物質(zhì)的均勻性要求;
穩(wěn)定性:ERM-BF427d 98140玉米標(biāo)準(zhǔn)品-20℃儲存 30 個月 DNA 降解率≤4%,4℃儲存 10 天活性保留率≥90%,反復(fù)凍融≤5 次無顯著活性變化;
特異性:與轉(zhuǎn)基因玉米 MON810、NK603、Bt11 等 22 個品系無交叉反應(yīng)(qPCR 檢測 Ct 值>38);
基質(zhì)兼容性:適配 qPCR(Roche LightCycler 480)、數(shù)字 PCR(Bio-Rad QX200)、LAMP 等溫擴增等主流檢測平臺。
2. 應(yīng)用場景與操作要點
檢測方法驗證:ERM-BF427d 98140玉米標(biāo)準(zhǔn)品用于評估 98140 玉米檢測試劑盒的準(zhǔn)確性與檢出限,如某試劑盒經(jīng)該標(biāo)準(zhǔn)品驗證,檢出限達(dá) 0.004%(符合歐盟 EC 1829/2003 法規(guī)要求),定量偏差≤3%;
實驗室質(zhì)控:作為室內(nèi)質(zhì)控品(IQC)監(jiān)控日常檢測穩(wěn)定性,或參與室間質(zhì)評(EQA),如 2024 年歐盟轉(zhuǎn)基因檢測 EQA 中,使用該標(biāo)準(zhǔn)品的實驗室合格率達(dá) 95%(較無標(biāo)準(zhǔn)品組提升 23%);
貿(mào)易合規(guī)檢測:支撐進出口玉米及加工品(如玉米粉、淀粉)的 98140 成分篩查,滿足歐盟 0.9%、中國 0.5% 的轉(zhuǎn)基因標(biāo)簽閾值判定需求。
3. 局限性說明
不適用于玉米深加工產(chǎn)品(如玉米乙醇、玉米油)的檢測,因深加工過程中 DNA 降解嚴(yán)重,基質(zhì)成分(如乙醇、脂肪)會抑制 PCR 反應(yīng);
ERM-BF427d 98140玉米標(biāo)準(zhǔn)品溶解后需在 4℃避光保存,48 小時內(nèi)使用,超時后 DNA 降解率>10%;
高濃度玉米淀粉(≥15 mg/mL)會吸附 DNA,導(dǎo)致檢測結(jié)果偏低,需采用 CTAB - 十六烷基三甲基溴化銨法去除淀粉干擾。
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